Przeglądaj wg Autor "Polasik , Daniel promotor pomocniczy"

Teraz wyświetlane 1 - 1 z 1
  • Miniatura
    PozycjaOpen Access
    Ocena funkcjonalnych i strukturalnych zmian plemników knura podczas przechowywania nasienia w stanie płynnym z uwzględnieniem polimorfizmu genów CD9,DAZL, ESR2 i PIWIL4 oraz grupy genetycznej
    (Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny w Szczecinie, 2024) Kwita, Ewa; Udała, Jan promotor; Polasik , Daniel promotor pomocniczy; Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny. Wydział Technologii i Hodowli Zwierząt. Katedra Biotechnologii i Rozrodu Zwierząt i Higieny Środowiska; Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny. Wydział Technologii i Hodowli Zwierząt. Katedra Biotechnologii i Rozrodu Zwierząt i Higieny Środowiska; Zachodniopomorski Uniwersytet Technologiczny. Wydział Technologii i Hodowli Zwierząt. Katedra Biotechnologii i Rozrodu Zwierząt i Higieny Środowiska
    Inseminacja w hodowli świń ma już ponad 50 letnią historię i spośród dostępnych technologii reprodukcyjnych jest metodą w największym stopniu wykorzystywaną w doskonaleniu postępu genetycznego. W przypadku trzody chlewnej nasienie kriokonserwowane ma niewielkie zastosowanie, a przyczyną tego jest duża wrażliwość plemników knura na szok chłodowy, wiązana ze składem błony plazmatycznej tych gamet, ulegającej strukturalnemu uszkodzeniu. Stąd też nasienie samców tego gatunku zwierząt przechowywane jest głównie w stanie płynnym, a jego przydatność do wykorzystania ograniczona jest zazwyczaj do kilkunastu dni i zależy od wielu czynników środowiskowych i genetycznych. Celem pracy było określenie zmian strukturalno-funkcjonalnych plemników przechowywanych w stanie płynnym z uwzględnieniem polimorfizmu genów CD9, DAZL, ESR2 i PIWIL4 oraz rasy/grupy genetycznej knurów. Badania przeprowadzono na 195 knurach ras/grup genetycznych: duroc, duroc × pietrain, pbz, PIC oraz wbp w wieku od 18 do 36 miesięcy. Po pobraniu i rozrzedzeniu nasienia w rozcieńczalnikach Vitasem LD oraz Gedil przechowywano je w tubach w temperaturze 16 °C. Pierwszego dnia badań wykonano preparaty morfologiczne (eozyna – nigrozyna) określając odsetek plemników żywych i z nieuszkodzonym akrosomem, procent plemników z wadami morfologicznymi głównymi i podrzędnymi. W 1., 3., 5. i 7. dniu określano procent plemników o ruchu postępowym na stoliku Bloma, ruchliwość plemników (system CASA), ocenę integralności błony komórkowej i aktywności mitochondriów plemników na podstawie barwienia fluorescencyjnego (fluorochromy SYBR-14 i PI, JC-1), oraz integralności akrosomów (lektyna PNA). Analizę genetyczną knurów wykonano na wyizolowanym z plemników DNA, identyfikując polimorfizmy wybranych genów metodą PCR–RFLP. wybranych genów metodą PCR–RFLP. Przeprowadzone badania wykazały, że czas konserwacji miał istotny wpływ na ruchliwość plemników ocenianą metodą tradycyjną na stoliku Bloma i za pomocą systemu CASA, integralność błony komórkowej i akrosomu oraz aktywność mitochondriów plemników. Wraz z upływem czasu konserwacji oceniane wskaźniki charakteryzujące kinetykę i żywotność plemników oraz integralność błony komórkowej ulegały wyraźnemu pogorszeniu. Skłania to do wykonywania zabiegów inseminacyjnych, o ile to możliwe, nasieniem mającym krótszy okres przechowywania. W przypadku różnych wskaźników wykazano istotne różnice między wariantami polimorficznymi genów, z wyjątkiem genu PIWIL4. Stwierdzono jednocześnie istotny wpływ rasy/grupy genetycznej na kształtowanie się tych cech, co nie pozwala na jednoznaczną preferencję nasienia knurów z daną formą polimorficzną do konserwacji w stanie płynnym. Najwyższymi wartościami analizowanych wskaźników w czasie przechowywania, z wyjątkiem wysokiej aktywności mitochondriów, ogólnie charakteryzowały się knury linii PIC, a najniższymi knury rasy wbp, u których między pierwszym a ostatnim dniem wystąpiły największe różnice. Wykazane pozytywne zależności między procentowym udziałem plemników o ruchu postępowym ocenianym szacunkowo pod mikroskopem a wskaźnikami charakteryzującymi ruchliwość plemników, integralność ich błony komórkowej i aktywność mitochondriów wskazują na pełną przydatność powszechnie wykorzystywanej metody w praktyce laboratoryjnej do określania jakości nasienia i kwalifikacji ejakulatów do dalszego wykorzystania w inseminacji.